放射免疫分析
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放射免疫分析（英文：Radioimmunoassay，RIA），又稱為放射免疫分析法、放射免疫測定或放射免疫測定法，簡稱放免或放免法，是一種在無須采用生物測定方法的情況下用于檢測抗原（例如，血清之中激素的水平）的實驗室測定方法。這一方法是由羅莎琳·薩斯曼·耶洛和Solomon Aaron Berson于二十世紀50年代創建的[1]。1977年，耶洛因為建立胰島素的RIA檢測方法而獲得諾貝爾醫學獎：在內分泌學領域，當時認為對于此類微量激素的精確測定乃是一種突破。
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基本原理
RIA的基本原理為：放射性同位素標記的抗原（簡稱“標記抗原”）和非標記抗原（標準抗原或待測抗原）同時與數量有限的特異性抗體之間發生競爭性結合（抗原－抗體反應）。由于標記抗原與待測抗原的免疫活性完全相同，對特異性抗體具有同樣的親和力，當標記抗原和抗體為數量恒定時，待測抗原和標記抗原的總量大于抗體上的有效結合點時，標記抗原-抗體復合物的形成將隨著待測抗原量的增加而減少，而非結合的或游離的標記抗原則隨著待測抗原數量的增加而增加（也就是所謂的競爭結合反應），因此測定標記抗原-抗體或標記抗原即可推出待測抗原的數量。
抗原的放射性標記常常是利用碘發射γ射線的放射性同位素與酪氨酸結合來實現的。病人血清等標本之中所含的是未經放射性標記的抗原（亦可稱為“冷”抗原），即待測抗原。總體上來說，特異性抗體之上抗原結合部位的數量是有限的。相對有限的抗原結合部位而言，標記抗原與待測抗原之間屬于競爭關系。通過繪制結合曲線，即可計算出病人血清之中待測抗原的確切數量。
在采用這種方法的時候，結合抗原與非結合抗原之間的分離至關重要。最初，為了沉淀和離心抗原－抗體反應所形成的免疫復合物，分離方法采用的是針對第一抗體的第二抗體。后來，在對T3和T4進行RIA測定時，哥倫比亞大學的Werner和Acebedo對RIA方法進行了擴展，采用活性炭懸濁液進行沉淀[2]。1975年，Acebedo和Hayek等人在BBRC之上發表了人TSH的超微量RIA法[3]。
優缺點
RIA技術極其敏感而又極其特異，但其卻需要具備尖端復雜的設備，且成本也不低。同時，RIA還需要特殊的預防措施，因為其要用到放射性物質。因此，如今RIA在很大程度上已經被ELISA所取代。就ELISA而言，抗原－抗體反應的測定采用的是顏色變化信號，而不是放射性信號。
參考文獻
- ↑ Yalow RS, Berson SA. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man. J Clin Invest 1960;39:1157-75. PMID 13846364.
- ↑ Werner SC, Acebedo G, Radichevich I. Rapid radioimmunoassay for both T4 and T3 in the same sample of human serum. J. Clin. Endocrinol. Metab.. 1974, 38 (3): 493–5. PMID 4815178.
- ↑ Acebedo G, Hayek A, Klegerman M, Crolla L, Bermes E, Brooks M. A rapid ultramicro radioimmunoassay for human thyrotropin. Biochem. Biophys. Res. Commun.. 1975, 65 (2): 449–56. doi:10.1016/S0006-291X(75)80168-9. PMID 1148002.
參見
外部鏈接
- MeSH（醫學主題詞）上面的Radioimmunoassay
- Radioimmunoassay- procedure
- http://www.lib.mcg.edu/edu/esimmuno/ch4/radassay.htm
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