醫(yī)學(xué)微生物學(xué)/鉤端螺旋體
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鉤端螺旋體（Leptospira）簡(jiǎn)稱鉤體，種類(lèi)很多，可分為致病性鉤體及非致病性鉤體兩大類(lèi)。致病性鉤體能引起人及動(dòng)物的鉤端螺旋體病，簡(jiǎn)稱鉤體病，是在世界各地都廣泛流行的一種人畜共患者，我國(guó)絕大多數(shù)地區(qū)都有不同程度的流行，尤以南方各省最為嚴(yán)重，對(duì)人民健康危害很大，是我國(guó)重點(diǎn)防治的傳染病之一。
目錄 |
一、生物學(xué)性狀
（一）形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色及培養(yǎng)
菌體纖細(xì)，長(zhǎng)短不一，一般為6～20um,寬0.1～0.2um，具有細(xì)密而規(guī)則的螺旋，菌體一端或兩端彎曲呈鉤狀，常為“C”、“S”等形狀。在暗視野顯微鏡下可見(jiàn)鉤體象一串發(fā)亮的微細(xì)珠粒，運(yùn)動(dòng)活潑，可曲屈，前后移動(dòng)或圍繞長(zhǎng)軸作快速旋轉(zhuǎn)（見(jiàn)圖16～2）。
圖16～2 鉤端螺旋體（暗視野映光法）
電鏡下鉤體為圓柱狀結(jié)構(gòu)，最外層是鞘膜，由脂多糖和蛋白質(zhì)組成，其內(nèi)為胞壁，再內(nèi)為漿膜，在胞壁與漿膜之間有一根由兩條軸絲扭成的中軸，位于菌體一側(cè)。鉤體是以整個(gè)圓柱形菌體纏繞中軸而成，鉤體的胞壁成份與革蘭氏陰性桿菌相似。
鉤體革蘭氏染色為陰性，不易被堿性染料著色，常用鍍銀染色法，把菌法染成褐色，但因銀粒堆積，其螺旋不能顯示出來(lái)。
鉤體是唯一可用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)的螺旋體，最適濕度8～30℃，pH7.2～7.5，常用柯索夫(Korthoff )氏液培養(yǎng)基培養(yǎng)，生長(zhǎng)緩慢，接種后3～4天開(kāi)始繁殖，1～2周后，液體培養(yǎng)基呈半透明去霧狀混濁生長(zhǎng)。
（二）抵抗力
鉤體對(duì)理化因素的抵抗力較其他致病螺旋體為強(qiáng)，在水或濕土中可存活數(shù)周至數(shù)月，這對(duì)本菌的傳播有重要意義，該螺旋體對(duì)干燥、熱、日光直射的抵抗力均較弱，56℃10分鐘即可殺死，60℃只需10秒，對(duì)常用消毒劑如0.5%來(lái)蘇、0.1%石炭酸、1%漂白粉等敏感，10～30分鐘可殺死，對(duì)青霉素、金霉素等抗生素敏感。
（三）抗原構(gòu)造與分型
致病性鉤體的抗原組成比較復(fù)雜，與分型有關(guān)的抗原主要有兩種：一種是表現(xiàn)抗原（P抗原），另一種是內(nèi)部抗原（S抗原）；前者存在于螺旋體的表面，為蛋白質(zhì)多糖的復(fù)合物，具有型特異性，是鉤體分型的依據(jù)；而后者存在于螺旋體的內(nèi)部，是類(lèi)脂多糖復(fù)合物，具有屬特異性，為鉤體分群的依據(jù)。目前全世界已發(fā)現(xiàn)20個(gè)血清群，200多個(gè)血清型，我國(guó)至少發(fā)現(xiàn)了18個(gè)血清群，70多個(gè)血清型。
二、致病性
（一）致病物質(zhì)
1．溶血毒素：不耐熱，對(duì)氧穩(wěn)定，具有類(lèi)似磷脂酶的作用，能使細(xì)胞膜溶解，當(dāng)注入小羊體內(nèi)時(shí)，可使小羊出現(xiàn)貧血、出血壞死、肝腫大與黃疸、血尿等。
2．細(xì)胞毒因子：在試管內(nèi)對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞有致細(xì)胞病變作用，小鼠腦內(nèi)接種1～2小時(shí)后出現(xiàn)肌肉痙攣，呼吸困難，最后死亡。
3．內(nèi)毒素樣物質(zhì)；其性質(zhì)不同于一般細(xì)菌的內(nèi)毒素，但也能使動(dòng)物發(fā)熱，引起炎癥和壞死。
此外，鉤體在宿主體內(nèi)的代謝產(chǎn)物如有毒脂類(lèi)以及某些酶類(lèi)：如脂酶、脫氫酶、萘酰氨酶、三油酸脂酶、脲酶等，可損害毛細(xì)血管壁，使其通透性升高，引起廣泛出血，對(duì)腎也有損害，可致血尿、蛋白尿等。
（二）致病過(guò)程及臨床類(lèi)型
鉤體病為自然疫源性疾病，在野生動(dòng)物和家畜中廣泛流行。鉤體在腎小管中生長(zhǎng)繁殖，從尿中排出。腎長(zhǎng)期帶菌的鼠和豬是鉤體的重要儲(chǔ)存宿主和傳染源。豬、鼠的尿污染的水源、稻田、小溪、塘水等稱為疫水，人在參加田間運(yùn)動(dòng)、防洪、捕魚(yú)等接觸疫水時(shí)，由于鉤體有較強(qiáng)的侵襲力，能穿過(guò)正常或破損的皮膚和粘膜，侵入人體。進(jìn)食被病鼠排泄物污染的食物或飲水時(shí)，鉤體可經(jīng)消化道粘膜進(jìn)入人體，也可經(jīng)胎盤(pán)感染胎兒引起流產(chǎn)；此外，鉤體還可經(jīng)吸血昆蟲(chóng)傳播。
人群普通對(duì)鉤體易感，但發(fā)病率高低與接觸疫水的機(jī)會(huì)和機(jī)體免疫力有關(guān)。以農(nóng)民、支農(nóng)外來(lái)人員、飼養(yǎng)員及農(nóng)村青少年發(fā)病率較高。鉤體病主要有在多雨、鼠類(lèi)等動(dòng)物活動(dòng)頻繁的夏、秋季節(jié)流行，這時(shí)節(jié)環(huán)境被鉤體污染嚴(yán)重，加這農(nóng)忙，人們與疫水接觸機(jī)會(huì)多。
鉤體通過(guò)皮膚粘膜侵入機(jī)體，約在局部經(jīng)7～10天潛伏期，然后進(jìn)入血流大量繁殖，引起早期鉤體敗血癥。在此期間，由于鉤體及其釋放的毒性產(chǎn)物的作用，出現(xiàn)發(fā)熱、惡寒、全身酸痛、頭痛、結(jié)膜充血、腓腸肌痛。鉤體在血中約存在一個(gè)月左右，隨后鉤體侵入肝、脾、腎、肺、心、淋巴結(jié)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等組織器官，引起相關(guān)臟器和組織的損害和體征。由于鉤體的菌型、毒力、數(shù)量不同以及機(jī)體免疫力強(qiáng)弱不同，病程發(fā)展和癥狀輕重差異很大，臨床上常見(jiàn)有下列幾種類(lèi)型：
1．流感傷寒型：是早期鉤體敗血癥的癥狀，臨床表現(xiàn)如流感，癥狀較輕，一般內(nèi)臟損害也較輕。
2．黃疸出血型：除發(fā)熱、惡寒、全身痛處還有出血、黃疸及肝腎損害癥狀。出血可能與毛細(xì)血管損害有關(guān)，即鉤體毒性物質(zhì)損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，使毛細(xì)血管通透性增高，導(dǎo)致全身器官，主要是肝、脾、腎點(diǎn)狀出血或瘀斑，表現(xiàn)為便血及肘細(xì)胞損傷，出現(xiàn)黃疸。
3．肺出血型：有出血性肺炎癥狀，如胸悶、咳嗽、咯血、紫紺等，病情兇險(xiǎn)，常死于大咯血，死亡率高。
此外，尚有腦膜腦炎型，腎功能衰竭型，胃腸炎型等，均表現(xiàn)相應(yīng)器官損害的癥狀；部分病人還可能出現(xiàn)恢復(fù)期并發(fā)癥，如眼葡萄膜炎、腦動(dòng)脈炎、失明、癱瘓等，可能是由于變態(tài)反應(yīng)所致。
鉤體菌型與鉤體臨床分型無(wú)固定關(guān)系，臨床分型隨病情發(fā)展也可變動(dòng)。
三、免疫性
感染早期機(jī)體可通過(guò)非特異性免疫殺滅鉤體，但作用不強(qiáng)。感染1～2周后血中可出現(xiàn)特異性抗體，具有調(diào)理、凝集和溶解鉤體，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用。特異性抗體出現(xiàn)后可迅速清除血中鉤體，一般7～10天可把器官中的鉤體清除，但腎臟中鉤體受抗體影響較小，維持時(shí)間長(zhǎng)。故尿中可較長(zhǎng)時(shí)間（數(shù)周～數(shù)年）排菌。
鉤體隱性感染或病后可獲得對(duì)同型鉤體的持久免疫力，以體液免疫為主，細(xì)胞免疫作用不大。
四、微生物學(xué)檢查
（一）病原學(xué)檢查
發(fā)病一周內(nèi)取血液，第二周以后取尿，有腦膜炎型癥狀者取腦脊液進(jìn)行檢查。
1．顯微鏡檢查 直接鏡檢： 取抗凝血1000轉(zhuǎn)/分、離心10分鐘，除去血細(xì)胞；血漿再以10000轉(zhuǎn)/分，離心40分鐘，棄上清取沉淀物暗視野顯微鏡檢查。染色鏡檢：涂片后用Fontana鍍銀染色鏡檢。另外，還可用免疫熒光法或免疫酶染色法檢查。
2．分離培養(yǎng)與鑒定 將血液數(shù)滴接種于柯氏（Korthoff）培養(yǎng)基（4.5～5ml），每份標(biāo)本接種2～3管，于30℃培養(yǎng)5天，每隔3～5天，用暗視野顯微鏡檢查一次。如有鉤體生長(zhǎng)，再傳代培養(yǎng)，用生長(zhǎng)良好的菌液作鑒定，陰性者至少培養(yǎng)30～40天，仍未查到才能報(bào)告。尿液標(biāo)本一般需濃縮（離心）后培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)需加抑菌劑如5-氟尿嘧啶等；也可將標(biāo)本接種于豚鼠腹腔進(jìn)行分離。
（二）血清學(xué)試驗(yàn)
一般在病初及發(fā)病2～3周各采血一次進(jìn)行下列試驗(yàn)。
1．顯微鏡凝集試驗(yàn)
是目前常用的方法，用標(biāo)準(zhǔn)株或當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)菌侏作抗原，分別與病人不同稀釋度的血清混合，在37℃作用2小時(shí)，然后滴片作暗視野顯微檢查。若待檢血清中有某型抗體存在，則在同型抗原孔中可見(jiàn)鉤體凝集成團(tuán)，形如小蜘蛛，一般病人凝集效價(jià)在1：400以上或晚期血清比早期血清效價(jià)高4倍以上有診斷意義。
2．間接凝集試驗(yàn)將鉤體屬特異性抗原吸附于載體上成為具有鉤體屬特異性的顆粒抗原，常用的載體有綿羊紅細(xì)胞、活性炭、乳膠顆粒等，這些抗原致敏的顆粒在玻片上與病人血清中相應(yīng)的抗體作用，可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集。此法敏感性差，但快速簡(jiǎn)便，尤其是炭凝集及乳膠凝集試驗(yàn)，適于基層醫(yī)療單位作鉤體病的輔助診斷。
另外，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、間接免疫熒光試驗(yàn)、ELISA等血清學(xué)方法亦可用于診斷。
五、防治原則
消滅傳染源：大力滅鼠，加強(qiáng)病畜管理。
切斷傳播途徑：保護(hù)好水源，避免或減少與疫水接觸。
3．提高易感人群免疫力：對(duì)流行區(qū)的居民、礦工、飼養(yǎng)員及外來(lái)易感人員進(jìn)行多價(jià)鉤體死疫苗接種。
4．治療：鉤體對(duì)多種抗生素敏感，但以青霉素效果最好，對(duì)過(guò)敏者可用慶大霉素或金霉素。
參看
 螺旋體 | 梅毒螺旋體  |
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