核苷酸基轉(zhuǎn)移酶
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核苷酸轉(zhuǎn)移酶(nucleotidyl transferase)是將核苷酸從一物質(zhì)轉(zhuǎn)移至另一物質(zhì)的酶。包括末端核苷酸轉(zhuǎn)移酶,DNA聚合酶,RNA聚合酶。
- 末端核苷酸轉(zhuǎn)移酶(terminal nucleotidyl transferase)
這是一種在反應(yīng)混合物中有任何堿基存在時(shí)能使DNA鏈在3′—OH端延伸的酶。可用于遺傳載體的構(gòu)建以產(chǎn)生同聚物粘性尾巴,以便達(dá)到將過(guò)客DNA拼接在質(zhì)粒上的目的過(guò)客DNA和質(zhì)粒分別有如聚腺苷酸和聚胸苷酸的互補(bǔ)堿基,因而易于退火并連接在一起,末端核苷酸轉(zhuǎn)移酶在成年骨髓細(xì)胞中也表達(dá),并產(chǎn)生免疫球蛋白的多樣性。
- DNA聚合酶(DNA polymerase)
原核生物的DNA聚合酶有3種,真核生物有5–6種主要DNA聚合酶,這些DNA聚合酶有聚合功能。
- RNA聚合酶(RNA polymerase)
依賴(lài)于DNA的RNA聚合酶,以DNA為模板合成RNA。在原核生物中,一種聚合酶合成細(xì)胞所有RNA。真核生物RNA聚合酶有四個(gè)亞基,即α、β、β′和σ。大的β亞基在進(jìn)化上是高度保守性的,它們與其他亞基一起是聚合的主要工具。原核生物RNA聚合酶的分子量約為500×103。α亞基識(shí)別啟動(dòng)子,β′亞基與DNA結(jié)合,而β亞基在RNA聚合作用中有活性。σ對(duì)起始轉(zhuǎn)錄是必要的。它通過(guò)打開(kāi)DNA雙螺旋以便讓RNA聚合酶進(jìn)行聚合作用這樣一種特殊方式來(lái)起始轉(zhuǎn)錄的。真核生物的細(xì)胞器含有原核生物型RNA聚合酶。真核生物RNA聚合酶II約有10個(gè)亞基,所以要稍大一些。在寬廣的系統(tǒng)發(fā)生范圍內(nèi)高度同源,最大的兩個(gè)亞基與原核生物的β亞基相似。在真核細(xì)胞中有3種不同的依存在DNA的RNA聚合酶(I,II,III)。RNA聚合酶復(fù)制RNA病毒的基因組。這些酶與DNA聚合酶不同,沒(méi)有校讀功能,結(jié)果其錯(cuò)誤發(fā)生率在每一個(gè)核苷酸10?3 至10?4 范圍內(nèi),從而引起RNA病毒的極端多樣性。
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