臨床生物化學/血氣分析儀分析方法

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臨床生物化學

體液平衡紊亂
- 血氣分析
  - 血液氣體運輸
  - 血液pH值及其運算
  - 血氣分析儀測定原理及儀器結構
  - 血氣分析儀分析方法
  - 血氣檢測的質量控制

（一）血標本采集

血氣分析標本的收集是極為重要的，若處理不當，將產生很大的誤差，甚至比儀器分析的誤差還大，因此必須引起足夠的重視。

血氣標本以采動脈血或動脈化毛細血管血為主，靜脈血也可供作血氣測定。只有動脈血才能真實反映體內代謝氧化作用和酸堿平衡的狀況，對O₂檢測的有關指標必須采集進入細胞之前的動脈血，也就是血液中從肺部運氧到組織細胞之間的動脈血，才能真正反映體內氧的運輸狀態。動脈血液的氣體含量幾乎無部位差異，從主動脈到末梢循環都是均一的。

對PCO₂和pH的檢測也以采集動脈血為好。血液循環無障礙的病人，靜脈血的這兩項指標基本也可反映體液酸堿狀況。

⒈標本采取方法

⑴動脈血：肱動脈、股動脈、前臂動脈以及其他任何部位的動脈都可以進行采血。使用玻璃注射器采血，抗凝劑為肝素鈉。每支肝素鈉每亳升含12500U，相當于100mg，用20ml生理鹽水稀釋，分裝成40支，消毒備用（4℃貯存）。臨用時，注射器吸取肝素鈉溶液一支，而后將肝素液來回抽動，使針筒局部濕潤，多余肝素液全部排出棄之，注射器內死腔殘留的肝素液即可抗凝。針刺動脈血管，讓注射器內芯隨動脈血進入注射器而自動上升，取1-2ml全血即可。拔針后，注射器不能回吸，只能稍外推，使血液充滿針尖空隙，并排出第一滴血棄之，讓空氣排盡，將塑料嘴或橡皮泥封住針頭，隔絕空氣，再把注射器來回搓滾，混勻抗凝血，立即送檢。或者采用微量取樣器采集血標本。

⑵動脈化毛細血管血：所謂動脈化的毛細血管血就是指局部組織末梢經45℃溫水熱敷，使循環加速，血管擴張，局部毛細血管血液中PO₂和PCO₂值與毛細血管動脈端血液中的數值相近，此過程稱為毛細血管動脈化。采血部位以手指、耳垂或嬰兒的手足跟及拇趾為宜。用45℃熱水敷局部，5-15min后或直至皮膚發紅，而后穿刺，穿刺要深，使血液快速自動流出，棄去第一滴血。不能擠壓，擠出的血液的測定結果不可信。未充分動脈化的毛細血管血的PO₂測定值偏低，對pH、PCO₂和HCO₃^－的測定結果影響不明顯。

用肝素鋰抗凝比肝素鈉好，因為鋰含量（3.5％-4.5％）比鈉（9.5％-12.5％）少，可減少血中微纖維形成的可能；同時可排除了同一樣本測定鈉時出現錯誤的危險，特別是現在一些儀器將血氣與電解質測定配套進行，即一份全血既測定血氣又測定鈉鉀氯等電解質。

⑶靜脈血：靜脈血所測結果不適用于了解體內O₂的運輸狀態，故PO₂及有關推算數據僅供參考，對pH及PCO₂等酸堿平衡指標是適用的。采靜脈血盡可能不使用止血帶。

⒉注意事項

⑴讓病人處于安定舒適狀態，臥床5分鐘后采血。

⑵在病人進行治療過程中采血要特別注意：①若進行輔助或人工呼吸時，采血前至少要等20分鐘，讓其在完全控制自如的人工呼吸狀態下采血。②若病人進行氧氣吸入時，作血氣測定，應注意氧氣流量，以備計算出該病人每分鐘吸入的氧含量。例如病人吸氧速度為6L/min，吸氧器的呼吸循環純氧氣為3L/min,其余3L為周圍空氣（PCO₂=0.209），因此病人每分鐘得到3L純氧及3×0.21=0.63L來自周圍空氣的氧氣，因此6L總體積中含有3.6L氧氣，含量為60％，此時PO₂=0.6。③若是體外循環病人，應在血液得到混勻后再進行采血。

⑶抗凝劑以肝素鋰為好。對于同時作血氣、血鈣或血鋰的標本，則不能用肝素鋰抗凝，因為肝素可與部分鈣結合造成誤差，此時就要用鈣緩沖液肝素試劑抗凝。使用液體肝素抗凝劑濃度為500-1000U/ml為宜，含量過低，抗凝劑體積過大，易造成稀釋誤差；若含量過高也易引起誤差。最好使肝素鋰以均勻分布于毛細玻管周邊壁上為宜，對標本既無稀釋作用又有利于樣品的抗凝。

⑷注意防止血標本與空氣接觸，應處于隔絕空氣的狀態。因為：①空氣中PO₂高（21.17kPa或150mmHg）于血液，PCO₂低（0.040kPa或0.3mmHg）于血液，一旦血液與空氣接觸，大氣中O₂會從高壓的空氣中進入血液，造成血液PO₂高的誤差；CO₂又會從高壓的血液彌散到大氣中，使血液PCO₂測出結果偏低。大于標本10％的空氣氣泡會明顯影響PO₂值。②與空氣接觸，易造成空氣污染血標本。

⑸標本放置時間：采出的全血中有活性紅細胞，其代謝仍在繼續進行，O₂不斷地被消耗，CO₂不斷地產生。有報道標本于體外37℃保存，每10分鐘PCO₂約增加1mmHg，pH值降低約0.01單位。血樣于4℃保存1小時內，其中pH、PCO₂值沒有明顯變化，PO₂值則有改變。按要求，采取的血標本應在30分鐘內檢測完畢，如30分鐘后不能檢測，應將標本置于冰水中保存，最多不超過2小時，在30分鐘到2小時之間，血PO₂值是個懷疑值，僅供參考。

⑹采末梢血須是動脈化的毛細血管血，只有高灌注局部組織的代謝變化，其靜脈血pH、PCO₂、PO₂與動脈血所測值才非常接近。

（二）儀器操作簡介

目前使用的血氣分析儀生產廠家多，型號各異，但性能和操作大同小異。現以AVL995血氣酸堿分析儀為例，簡要介紹該儀器的使用方法。

AVL945、995裝有PO₂、PCO₂和pH電極，直接測定全血，實際上是測定血漿PO₂、PCO₂和pH，因為這些電極直接接觸的標本是血漿，而未能伸入到紅細胞內。測出這三個指標后，再通過儀器運算出其他指標。

⒈啟動按儀器要求分別接通主機和空氣壓縮機電源，使空氣壓縮機壓力到達額定的要求。再開啟二氧化碳氣瓶，使CO₂氣流量達到額定要求。分別檢查洗滌液、參比液、標準緩沖液1和2等液體是否按要求裝備。

⒉定標該機定標分兩種形式，即兩點定標和一點定標，與其他型號儀器一樣可進行總兩點自動定標。總兩點定標是先用兩種緩沖液對pH電極系統進行定標，再用混合后的兩種不同含量的氣體對PCO₂和PO₂電極進行定標。兩點定標是讓儀器建立合適的工作曲線。一點定標是每隔一定的時間檢查一下電極偏離工作曲線的情況。開機后，兩點定標自動進行是必須做的工作，并且不能中斷。進行過兩點定標后，儀器每隔12小時左右再自動進行下一次兩點定標，必要時可根據情況任意選用定標程序再定標。兩點定標后，每隔0.5-3小時，儀器用緩沖液1對pH電極系統進行一點定標。儀器還進行氣體定標，先用氣體2(CO₂)對PCO₂電極進行定標，最后用氣體1（混合氣）對PCO₂和PO₂電極進行定標。

⒊測量從開機到兩點定標完成后，儀器屏幕上顯示“READY”，即已準備好，此時可進行測量。一般測量用注射器進樣或毛細管進樣兩種方式進行。

⑴注射器進樣：按Syring（注射器）鍵，轉換盤轉到進樣位置，用注射器慢慢注入血樣，直到儀器屏幕顯示Measure（測量），下行顯示：拔出注射器，按START鍵。蠕動泵開始轉動，將血樣吸入測量室。當血樣到達pH參比電極時，蠕動泵停轉，血樣停留在測量室中，儀器自動進行測量和計算。與此同時，輸入病人Hb量及體溫數、測出的pH、PO₂值及其計算值在屏幕顯示，并打印結果。由于AVL995Hb能自動測出病人血紅蛋白值，這種型號的儀器就可不必另輸Hb值，僅輸入體溫值即可。

測量一結束，儀器自動進行沖洗將血樣沖走，干燥后，進行一點定標，然后返回READY狀態，又可接著進行第二個樣品的測量。

⑵毛細管進樣：在儀器處于RDADY狀態時，按Capillary鍵，轉換盤轉到進樣位置。在進樣口插入裝有血樣的毛細管，儀器便自動把血樣吸入測量室，并停留在測量室自動進行檢測，以下各種步驟與注射器進樣法相同。

⑶微量樣品測量法：當采集的血量不足40μl而又多于25μl時，儀器自動進行微量樣品測量。進樣后，儀器屏幕顯示“微量樣品”，下行顯示“只測pH按1，其余按2”；如果還測pH、PCO₂和PO₂三個參數，需按“2”鍵。根據測量室血樣進入的位置交替按“START鍵”和“1”鍵，直至pH測量完。儀器經運算后，即可打印結果。進行微量樣品檢測時，一定要按血樣流動順序進行，認真操作，其所測值與全量血樣檢測結果基本一致。

⑷維護和保養：按說明書要求，對儀器要定期保養和維護。特別是對電極的定期保養極為重要。

使用操作人員，一定要熟悉儀器的測定原理、各部件的工作性能，并熟讀說明書，一般的故障應該學會處理，既大膽又心細。儀器一旦開機后，應該24小時連續開機使用，充分發揮儀器的效用，做到物盡其用。