臨床生物化學/細胞調節因子實驗室檢測的簡介

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臨床生物化學

蛋白質與臨床診斷
- 細胞調節因子
  - 細胞調節因子實驗室檢測的簡介

研究細胞因子在各種病理生理情況下的活動、分泌以及在治療中使用細胞因子制劑的效應，都要求能有效地檢測體內細胞因子的含量（濃度水平），以及檢測細胞因子的功能（生物效應）。

從前以細胞因子的生物學特征作為其含量分析的基礎，免疫分析及其它免疫化學或生物化學技術亦可用于此細胞因子的測定和部分鑒定，表2-14總結了已用于細胞因子功能測定和濃度（含量）測定的方法。

表2-14 細胞因子分析

生物分析	酶聯免疫吸附分析（ELISA）
動物分析	其它
增殖分析	受體結合分析
骨髓集落形成分析	免疫化學程序
細胞毒性或細胞穩定性分析	細胞或細胞中的測定
抗病毒分析	勻漿生物分析或免疫分析
次級分子分泌的誘導	免疫組化或免疫細胞分析
趨化作用或化學促進作用分析	流式細胞計數
細胞因子分泌活性的抑制	酶聯免疫印跡（ELISPOT）
免疫分析	反相溶血斑分析
放射免疫分析（RIA）	細胞因子mRNA原位雜交
免疫放射光譜分析（IRMA）

人細胞因子實驗測定的標準化：人細胞因子的實驗測定中仍存在諸多問題，選擇分析方法不恰當則可能導致混亂甚至錯誤的結論。有時有必要同時選擇幾種方法分析某些細胞因子。生物分析方法特異性差，那些使用細胞株的生物分析可能與不同細胞因子反應，而且可受非細胞因子分子的影響。用于維持細胞生物的細胞因子能強烈地影響某些依賴細胞對一些細胞因子的反應程度。有的細胞在連續傳代后可能失去對某些細胞因子的反應性，此外，由于抑制劑如受體拮抗劑、可溶性細胞因子受體或其他拮抗劑分子的存在，測得細胞因子活性結果可能會比實際活性偏低。

由于蛋白酶的存在或與抑制劑如可溶性受體形成復合物，免疫分析能測得失去生物活性或具部分生物活性的細胞因子分子，并可受到基質效應的影響。此外，特異性問題影響了細胞因子mRNA測定，而mRNA水平亦不一定與具生物活性的細胞因子水平相一致。其它影響自動免疫分析方法準確性的問題還包括抗體的選擇、分析的不均勻、分子糖基化的不同、寡聚體的形成及循環受體的影響，雖然免疫分析的結果并不一定反映細胞因子的生物活性，但一般而言，免疫分析及其它配體結合分析都更容易標準化。

目前，英國已能提供下列細胞因子的標準化參考試劑：IL-1α，IL-1β，IL-2-9，GM-SCF，M-CSF，TGF-α，TGF-β，TGF-γ，SCF，LIF（白血病抑制因子），IFN-α1，IFN-α2b，IFNγ，還能供應IFN-α2a，IFN-β及IFN-γ的國際標準。但于細胞因子分子的不均勻，其分析的標準化仍是問題。因此，要求各實驗室的細胞因子分析應參考國際標準。某些細胞因子具有易被破壞的特性，從而要求非常細致和標準化的取樣。

隨著細胞因子在治療上的不斷應用，其測定方法亦得到了廣泛的發展，臨床檢師必須選用正常的分析方法支持臨床醫生，為臨床診斷提供相對簡易的實驗程序和準確的操作技術。